母体血浆胎儿游离DNA Rh D基因型产前诊断检测

doi:10.3969/j.issn.1006-3110.2018.07.033

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摘要目的运用荧光定量PCR(quantitative realtime PCR, Q-PCR)技术检测Rh D阴性孕妇血浆中游离胎儿DNA进行无创性产前诊断胎儿Rh D基因型。方法通过微量 DNA 抽提技术,并利用琼脂糖凝胶电泳法富集孕妇血浆游离胎儿 DNA(Cell-free fetal DNA,cff DNA),用Q-PCR技术检测 43例Rh D阴性孕妇血浆cff DNA,测定不同孕期的孕妇全血和血浆中管家基因(β-actin)的含量,比较不同孕期孕妇全血和血浆DNA 含量的变化;并用男性性别决定基因(sex-determining region Y gene,SYR)确定胎儿 DNA 的存在,以未有妊娠史的健康女性和健康男性作为阴性和阳性基因对照;同时对孕男胎的Rh D阴性孕妇血浆cff DNA进行Rh D 基因外显子 7、10 和内含子 4 的特异性扩增,与孕妇产后采集的新生儿脐血Rh D 定型结果对比分析。结果 (1)孕妇早、中期孕组血浆DNA含量差异无统计学意义(P＞0.05),早、晚期和中、晚期孕组血浆 DNA差异有统计学意义(P＜0.05)。(2)43例Rh D阴性孕妇中26例经产后证实为男胎,母血浆中检测到SYR基因特异性扩增的 25 例,灵敏度为96.15%,特异度为94.44%,准确率为97.67%。(3)26例孕男胎孕妇血浆中胎儿 DNA 的Rh D基因型检测发现,有19例胎儿Rh D血型阳性,5例胎儿Rh D血型阴性,即24例胎儿 DNA 的Rh D基因型与表型相符,准确率为97.6%。结论运用Q-PCR技术检测Rh D阴性孕妇血浆中cff DNA进行无创性产前诊断胎儿Rh D基因型,是一种敏感性高、特异性好的无创性产前诊断方法,可用于临床诊断和预防新生儿Rh D溶血病。

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关键词 ：游离胎儿DNA, Rh D基因型, 无创性产前诊断, 实时荧光定量PCR

收稿日期: 2017-06-28

R446.7

基金资助:长沙医学院大学生创新课题(No.2016154)

通讯作者: 周琳, E-mail:Linzhou12@126.com。

作者简介: 彭司琪(1996-),女,湖南常德人,本科在读。

引用本文:

彭司琪, 郭雅兰, 李燕, 黎文珂, 郭硕, 周琳. 母体血浆胎儿游离DNA Rh D基因型产前诊断检测[J]. 实用预防医学, 2018, 25(7): 880-882.

链接本文:

https://www.syyfyx.com/CN/10.3969/j.issn.1006-3110.2018.07.033 或 https://www.syyfyx.com/CN/Y2018/V25/I7/880

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